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              大鼠大腸桿菌ELISA試劑盒供應商

              點擊次數:2347 發布時間:2013/8/26
              提 供 商: 上海研盟生物科技有限公司 資料大?。?/td>
              圖片類型: 下載次數: 218
              資料類型: DOC 瀏覽次數: 2347
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              大鼠大腸桿菌ELISA試劑盒供應商

              使用目的:

              本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中大腸桿菌含量。
              實驗原理
              本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠大腸桿菌水平。用純化的大鼠大腸桿菌抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大腸桿菌,再與HRP標記的大腸桿菌抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大腸桿菌呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠大腸桿菌濃度。
              試劑盒組成

              1
              30倍濃縮洗滌液
              20ml×1瓶
              7
              終止液
              6ml×1瓶
              2
              酶標試劑
              6ml×1瓶
              8
              標準品(96 ng/L)
              0.5ml×1瓶
              3
              酶標包被板
              12孔×8條
              9
              標準品稀釋液
              1.5ml×1瓶
              4
              樣品稀釋液
              6ml×1瓶
              10
              說明書
              1份
              5
              顯色劑A液
              6ml×1瓶
              11
              封板膜
              2張 
              6
              顯色劑B液
              6ml×1/瓶
              12
              密封袋
              1個

              大鼠大腸桿菌ELISA試劑盒供應商

              標本要求

              1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
              2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
              操作步驟
              1.         標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

              48 ng/L
              5號標準品
              150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
              24 ng/L
              4號標準品
              150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
              12 ng/L
              3號標準品
              150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
              6 ng/L
              2號標準品
              150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
              3 ng/L
              1號標準品
              150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

              2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
              3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
              4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
              5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
              6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
              7.         溫育:操作同3。
              8.         洗滌:操作同5。
              9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
              10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
              11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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